1 材料與方法 

1.1 材料與儀器 

4 種腐植酸鈉均來自于天津風(fēng)化煤，易溶于 水，重金屬含量均低于食品標(biāo)準(zhǔn)，為便于研究， 將其編號為腐植酸鈉 1、2、3、4；DPPH（1,1- 二苯基 -2- 三硝基苯肼）、三羥甲基氨基甲烷 （Tris）、濃鹽酸、無水乙醇、水楊酸、硫酸亞鐵、 雙氧水、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、鐵氰化鉀、 三氯乙酸、三氯化鐵，均為分析純；實(shí)驗(yàn)用水 為二次蒸餾水。BS224S 萬分之一電子天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；微量加樣器（100~500 μL），上海求精生化試劑儀器有限公司；微量取樣器（10~100 μL、 100~500 μL），杭州陸恒生物科技有限公司；722S 型分光光度計、KQ-100 超聲波清洗儀，鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司官網(wǎng)；SHZ-C 水浴恒溫振蕩器，江蘇省 金壇市華鋒儀器有限公司。

1.2 DPPH 自由基清除能力的檢測 

取 3 mL 不同濃度的樣品溶液，加入 3 mL 0.100 0 mmol/L 的DPPH溶液，搖勻，在室溫（25℃） 暗室條件下，靜置 30 min 后取出，在波長 517 nm 處 內(nèi)測定吸光度（蒸餾水為參比），記為A1。同法 3 mL 蒸餾水 + DPPH 溶液混勻測定吸光度記為A0。 3 mL 樣品溶液 + 3 mL 蒸餾水混勻測定吸光度記為 A2。按照式（1）計算自由基清除率。

1.2 DPPH 自由基清除能力的檢測 

取 3 mL 不同濃度的樣品溶液，加入 3 mL 0.100 0 mmol/L 的DPPH溶液，搖勻，在室溫（25℃） 暗室條件下，靜置 30 min 后取出，在波長 517 nm 處 內(nèi)測定吸光度（蒸餾水為參比），記為A1。同法 3 mL 蒸餾水 + DPPH 溶液混勻測定吸光度記為A0。 3 mL 樣品溶液 + 3 mL 蒸餾水混勻測定吸光度記為 A2。按照式（1）計算自由基清除率。

2 結(jié)果與討論

4 種不同濃度的腐植酸鈉對 DPPH 自由基都具有一定的清除能力，且不同腐植 酸鈉的清除能力隨著濃度的變化均以相同的趨勢變 化，隨著腐植酸鈉濃度的增加，清除能力逐漸提高。 當(dāng)濃度大于 0.70 mg/mL，腐植酸鈉對 DPPH 自由基 的清除能力增加明顯。當(dāng)濃度達(dá)到 1.10 mg/mL，4 種腐植酸鈉的清除率分別為 95.15 %、75.50 %、97.49 % 和 97.39 %，除腐植酸鈉 2 外，其余 3 種 腐植酸對 DPPH 自由基清除率均大于 95 %。綜上 所述，腐植酸鈉（ArOH）具有較強(qiáng)的抗氧化能力。

3 結(jié)論 

用 DPPH 自由基清除法、羥自由基 清除法、超氧陰離子自由基清除法、總還原力的測 定 4 種方法測得的 4 種不同的腐植酸鈉都具有較強(qiáng) 的自由基清除能力和一定的抗氧化能力，且隨著腐 植酸鈉濃度的增加，其抗氧化能力逐漸增強(qiáng)，這說 明腐植酸鈉作為一種抗氧化劑將具有較好的應(yīng)用 前景。但由于腐植酸鈉結(jié)構(gòu)復(fù)雜，關(guān)于其清除自由 基的有效成分和作用機(jī)理尚需進(jìn)一步的研究。

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